說(shuō)明：P2實(shí)驗室是用于初步的生物安全實(shí)驗，國標明確了相應要求,適用于對人和環(huán)境有中等潛在危害的
微生物.P2 實(shí)驗室主要用于初級衛生服務(wù)、診斷和研究，其實(shí)驗對象的危害等級為Ⅱ級（中等個(gè)體危害，
有限群體危害），具體定義為“能引起人類(lèi)或動(dòng)物發(fā)病，但一般情況下對健康工作者、群體、家畜或環(huán)境
不會(huì )引起嚴重危害的病源體，代表病原體：流感病毒。其操作必須嚴格控制管理制度執行，以確保實(shí)驗
室的安全。

P2實(shí)驗室操作規程
1. 目的
加強P2實(shí)驗室生物安全管理，規范實(shí)驗人員儀器設備、實(shí)驗操作行為，確保P2實(shí)驗室工作安全運行。
2．適用范圍
   適用于P2實(shí)驗室的管理與操作。
3．職責
3．1實(shí)驗人員：嚴格執行P2實(shí)驗室相關(guān)管理規定，規范操作行為。
3．2實(shí)驗室負責人：監督執行P2實(shí)驗室相關(guān)管理規定，及時(shí)糾正違規操作行為，發(fā)現不安全隱患及時(shí)上報。
3．3科室負責人：監督并定期抽查P2實(shí)驗室管理規定執行情況，及時(shí)發(fā)現并解決P2實(shí)驗室運行中出現的問(wèn)題。
4．準入要求
4．1  只有經(jīng)過(guò)授權的人員才允許進(jìn)入P2實(shí)驗室工作區。
4．2  16歲以下兒童禁止進(jìn)入P2實(shí)驗室工作區。
4．3  實(shí)驗人員要接受相應預防性生物制品的免疫接種。
4．4 禁止將無(wú)關(guān)動(dòng)物帶入實(shí)驗區。
4．5 外單位人員來(lái)訪(fǎng)、參觀(guān)、進(jìn)修，必須經(jīng)中心主管部門(mén)批準，未經(jīng)批準不得進(jìn)入P2實(shí)驗室工作區。
4．6 外來(lái)人員進(jìn)入P2實(shí)驗室，須由本室人員陪同，在嚴格遵守有關(guān)規定的條件下方可進(jìn)入，同時(shí)填寫(xiě)
《外來(lái)人員進(jìn)出實(shí)驗室特殊區域登記表》。
4．7 限制免疫耐受者進(jìn)入實(shí)驗室。
4．8 限制正在接受免疫抑制劑者進(jìn)入實(shí)驗室。
4．9 嚴禁在實(shí)驗室內吸煙、飲食、化妝等。
 
5．進(jìn)入程序
5．1進(jìn)入P2實(shí)驗室，伸手打開(kāi)緩沖間內空調和生物安全柜按鈕，使實(shí)驗室和生物安全柜凈化10分鐘以上。
方可進(jìn)入實(shí)驗室進(jìn)行實(shí)驗。。
5．2將實(shí)驗所需材料和物品放入生物安全柜中。
5．3進(jìn)入P2實(shí)驗室緩沖區，關(guān)閉外門(mén)，在工作服外加穿P2實(shí)驗室專(zhuān)用罩衣（緊口，后系帶），戴一次性
口罩、帽子和戴兩層手套, 換穿P2實(shí)驗室專(zhuān)用鞋。需要時(shí)打開(kāi)照明按鈕。
5．4進(jìn)入實(shí)驗室工作區，首先打開(kāi)照明按鈕，打開(kāi)前玻璃門(mén)，調節到要求的高度。將實(shí)驗所需物品一次
性放入實(shí)驗臺內，擺放要有秩序且要相對區分清潔物與污染物，凈化生物生物安全柜10分鐘左右。
5．5觀(guān)察實(shí)驗區負壓表指示數值是否在工作要求范圍內，如不能滿(mǎn)足要求則進(jìn)行負壓調節。觀(guān)察溫濕度
計，填寫(xiě)溫濕度計使用記錄。
5．6實(shí)驗人員手臂放進(jìn)生物安全柜內大約1分鐘后，即可按無(wú)菌要求進(jìn)行實(shí)驗操作。
5．7完成整個(gè)實(shí)驗操作后，將使用過(guò)的物品進(jìn)行分類(lèi)處理。消毒整個(gè)工作臺面，再讓排風(fēng)至少運行10分
鐘。
5．8放下前玻璃門(mén)，打開(kāi)生物生物安全柜紫外線(xiàn)燈進(jìn)行毒。
5．9離開(kāi)實(shí)驗操作區前脫去第二層手套放到指定容器內消毒處理。
5．10 填寫(xiě)儀器使用記錄。
6．實(shí)驗后物品、污染物處理
6．1對不可回收的污染物品小心包扎后，在高壓滅菌器內按規定要求進(jìn)行高壓滅菌處理。然后按醫用垃
圾交中心統一處理。
6．2對可回收的污染物品小心包扎后，在高壓滅菌器內按規定要求進(jìn)行高壓滅菌處理。之后轉入洗刷間
進(jìn)行洗刷。
6．3對一次性實(shí)驗用品放入容器內高壓滅菌，然后按醫用垃圾交中心統一處理。
6．4對不可高壓滅菌處理的物品，應選擇適當的消毒劑進(jìn)行浸泡消毒。可回收的物品，送洗刷室；不可
回收的物品，按中心“三廢”處理的有關(guān)規定執行。
7．出實(shí)驗室程序
7．1打開(kāi)實(shí)驗室內門(mén)，出來(lái)后隨手關(guān)閉。將實(shí)驗室專(zhuān)用罩衣脫下，掛在緩沖區，待稍后進(jìn)行紫外線(xiàn)消毒。
脫掉一次性帽子、口罩和手套，放入待消毒的垃圾筒內，按門(mén)鎖按鈕，打開(kāi)外門(mén)，更換拖鞋，打開(kāi)紫外
線(xiàn)按鈕，同時(shí)關(guān)閉排風(fēng)按鈕，然后關(guān)閉外門(mén)。注：若進(jìn)入時(shí)打開(kāi)照明，則此時(shí)應關(guān)閉。
7．2如實(shí)驗過(guò)程中在傳遞窗傳遞過(guò)污染性物品，在實(shí)驗后應進(jìn)行紫外線(xiàn)消毒。
7．3待消毒完畢后（至少30分鐘），關(guān)閉生物安全柜和紫外線(xiàn)按鈕。
8．注意事項
8.1 應保持實(shí)驗室環(huán)境清潔。
8.2 工作臺內部空間需用消毒劑擦洗，如消毒劑具有腐蝕性，要用自來(lái)水清洗臺面，以避免腐蝕。
8.3 操作臺內的實(shí)驗器具應避免阻擋前后的穿孔網(wǎng)格，并且避免把東西卷入其中。所有的操作應該在距
離前面的格柵約10厘米以?xún)鹊墓ぷ髅嫔线M(jìn)行。
8.4 操作時(shí)應動(dòng)作緩慢，減少不必要的手和手臂伸進(jìn)和伸出空氣屏障，以免影響氣流。
8.5 工作臺在操作時(shí)，應盡量減少實(shí)驗室內開(kāi)門(mén)、關(guān)門(mén)，人員走動(dòng)等情況，以免影響室內氣流。
8.6 通常情況下，在生物安全柜里面不要使用酒精燈或類(lèi)似的明火，因為他們會(huì )破壞氣流模式、損壞
HEPA過(guò)濾器，并且有火災的危險（除非有特殊的要求）。
8.7 警報燈或警鈴響時(shí)切勿繼續操作。
8.8 一旦工作臺在操作時(shí)出現意外事故，須在這些東西搬出之前，連同工作臺在內進(jìn)行全面消毒，如果
溢出的污水或液體集中在排液槽中，必須采取緊急措施將污水排出。同時(shí)填寫(xiě)《實(shí)驗室潛在危險材料
溢出或淺出記錄》。
8．9試驗結束后將試驗物品移出生物安全柜，不得將生物安全柜當成儲物箱。
9． 維護保養
9.1 當生物安全柜移動(dòng)后或實(shí)驗室布局改動(dòng)時(shí)，應該由有經(jīng)驗的工作人員對生物安全柜的屏障作用重新
進(jìn)行測試。
9.2 半年一次生物安全柜內沉降菌檢測：生物安全柜消毒清潔后，紫外線(xiàn)照射30分鐘，開(kāi)前門(mén)通風(fēng)十分
鐘后，于工作臺面中部均勻放置兩塊已制好、經(jīng)檢驗無(wú)菌的普通營(yíng)養瓊脂培養皿，打開(kāi)培養皿蓋，使
培養基表面暴露30分鐘，再將培養皿蓋蓋上后倒置，取出放36℃培養箱培養24小時(shí)以上，用肉眼直接
進(jìn)行菌落計數，以≤1為合格。
9.3 檢查前玻璃驅動(dòng)裝置的松緊度。
9.4每年請廠(chǎng)商對生物安全柜進(jìn)行風(fēng)速、潔凈度檢測一次。
9.5 根據需要更換紫外燈管和照明燈管。殺菌燈工作超過(guò)一定時(shí)間后會(huì )失去效果，當工作臺燈照強度
低于每平方厘米40微瓦時(shí)，就應更換新的殺菌燈。（可用紫外線(xiàn)燈表來(lái)測定工作臺表面的燈照強度）
9.6 應根據需要更換高效過(guò)濾器（HEPA），由專(zhuān)業(yè)人員進(jìn)行操作。（高效空氣過(guò)濾器的壽命取決于
如何使用它。在實(shí)驗室的正常條件下，可以預測本過(guò)濾器至少可以使用五年。）
9.7 在開(kāi)始工作之前要讓生物安全柜的風(fēng)機至少運行3-5分鐘使生物安全柜內的空氣進(jìn)行凈化。
9.8 定期對生物安全柜的工作臺面、內壁（不包括送風(fēng)濾器擴散板）和觀(guān)察窗的內表面用消毒劑
（75%酒精或1g/L有效氯）擦拭。再用無(wú)菌蒸餾水進(jìn)行擦拭以清除殘余的消毒劑。
9.9 注意避免物品或液體進(jìn)入格柵下面。經(jīng)常用柔性的清潔劑或玻璃專(zhuān)用清潔劑清洗箱體外表面
和玻璃。
9.10 每月消毒一次工作臺下面的托盤(pán)。


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