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細胞培育室

作者:admin 出處:科瓦特發(fā)表時(shí)間:2021-01-11 08:47:34
 

細胞培育室簡(jiǎn)介
  細菌培養實(shí)驗室是微生物實(shí)驗室里面的配套實(shí)驗室,細菌培養室用人工方法(使其在合適的溫度,濕度,光照度,PH值,潔凈度等環(huán)境下,使細菌生長(cháng)繁殖,培養出來(lái)的細菌用于研究、鑒定和應用。廣泛用于醫藥研究。
室內要求無(wú)菌操縱,要求工作環(huán)境和條件必須保證無(wú)微生物污染和不受其它有害因素的影響.細胞培養室和設計原則是防止微生物污染和有害因素影響,要求工作環(huán)境清潔,空氣清新,干燥和無(wú)煙塵.細胞培養室的設計原則一般是無(wú)菌操縱區設在室內較少走動(dòng)的內側,常規操縱和封閉培養于一室,而洗刷消毒在另一室. 與其他一般實(shí)驗室工作的主要區別在于要求保持無(wú)菌操作,避免微生物及其他有害因素的影響。一般標準的細胞培養室應包括配液室、準備室和培養室。三室既相互連接又相對獨立,各自完成培養過(guò)程中的不同操作。

細胞培育室

細胞實(shí)驗室可培育的細胞種類(lèi)
  干細胞培養
•腫瘤細胞的培養 <>
 • 上皮細胞的原代培養 <>
 • 內皮細胞原代培養 <>
 • 神經(jīng)原細胞原代培養 <>
 • 肌組織原代培養 <>
 • 巨噬細胞原代培養 <>
 • 293細胞培養 <>
 • 細胞的冷凍保存和解凍培養 <>
 • 小鼠胚胎干細胞的培養 <>
 • 小鼠骨髓來(lái)源樹(shù)突狀細胞(BMDC)的培養<>
 • 肺泡II型細胞分離培養 <>         
 • 肝枯否細胞分離培養 <>
 • 原代軟骨細胞分離培養 <>
 • 心肌細胞分離培養 <>
• 細胞轉染技術(shù)
備注:細胞培育室包括以上細胞品類(lèi),但不限于以上種類(lèi):

胞培養室的溫度
    維持培養細胞旺盛生長(cháng),必須有恒定而適宜的溫度.不同種類(lèi)的細胞對培養溫度要求也不同.人體細胞培養的標準溫度為36.5℃±0.5℃,偏離這一溫度范圍,細胞的正常代謝會(huì )受到影響,甚至死亡.培養細胞對低溫的耐受力較對高溫強,溫度上升不超過(guò)39℃時(shí),細胞代謝與溫度成正比;人體細胞在39-40℃1小時(shí),即能受到一定損傷,但仍有可能恢復;在40-41℃1小時(shí),細胞會(huì )普遍受到損傷,僅小半數有可能恢復;41-42℃1小時(shí),細胞受到嚴重損傷,大部分細胞死亡,個(gè)別細胞仍有恢復可能;當溫度在43℃以上1小時(shí),細胞全部死亡.相反,溫度不低于0℃時(shí),對細胞代謝雖有影響,但并無(wú)傷害作用;把細胞放進(jìn)25-35℃時(shí),細胞仍能生存和生長(cháng),但速度減慢;放在4℃數小時(shí)后,再回到37℃培養,細胞仍能繼續生長(cháng).細胞代謝隨溫度降低而減慢.當溫度降至冰點(diǎn)以下時(shí),細胞可因胞質(zhì)結冰受損而死亡.但是,假如向培養液中加進(jìn)一定量的冷凍保護劑(二甲亞砜或甘油),可在深低溫下如-80℃或-196℃(液氮)長(cháng)期保存.
 細胞培養室合適的氣體環(huán)境
    氣體是哺乳動(dòng)物細胞培養生存必須條件之一,所需氣體主要有氧氣和二氧化碳.氧氣參與三羧酸循環(huán),產(chǎn)生供給細胞生長(cháng)增殖的能量和合成細胞生長(cháng)所需用的各種成分.開(kāi)放培養時(shí)一般把細胞置于95%空氣加5%二氧化碳混合氣體環(huán)境中.二氧化碳既是細胞代謝產(chǎn)物,也是細胞生長(cháng)繁殖所需成分,它在細胞培養中的主要作用在于維持培養基的pH值.大多數細胞的適宜pH為7.2-7.4,偏離這一范圍對細胞培養將產(chǎn)生有害的影響.但細胞耐酸性比耐堿性大一些,在偏酸環(huán)境中更利于細胞生長(cháng).但有一些細胞也喜歡偏堿環(huán)境中生長(cháng),如成纖維細胞最適合pH是7.4-7.6.每種細胞都有其最適pH值.
 
細細胞培養實(shí)驗室的設置
細胞培養實(shí)驗室應能進(jìn)行六方面的工作:無(wú)菌操作、孵育、制備、清洗、消毒滅菌處理、儲藏。
細胞培育室整體布局圖

植物細胞培養實(shí)驗室設置
 1.基本實(shí)驗室
1.1 洗滌間   
 根據工作量的大小決定其大小,一般面積控制在30-50m2。在實(shí)驗室的一側設置專(zhuān)用的洗滌水槽,用來(lái)清洗玻璃器皿。中央實(shí)驗臺還應配置2個(gè)水槽,用于清洗小型玻璃器皿。如果工作量大,可以購置一臺洗瓶機。準備1-2個(gè)洗液缸,專(zhuān)門(mén)用于洗滌對潔凈度要求很高的玻璃器皿。此外還應配置落水架、干燥箱、柜子、超聲波清洗器等。   地面應耐濕并排水良好。 
 
1.2培養基配制間
        面積60平方米左右,配備的主要儀器設備有 :冰箱、天平、微波爐、pH計、培養基分裝器、藥品柜、器械柜、抽氣泵、電爐、各種規格的培養瓶、培養皿、移液管、燒杯、量筒、容量瓶、儲藏瓶等。冰箱以體積180-200L為宜,用于儲存培養基母液、激素維生素等貴重藥品、彩色膠卷、及保存植物材料。天平應有不同感量。 
 
1.3消毒間
      配備實(shí)驗臺、高壓滅菌鍋、排風(fēng)滅火設備、細菌過(guò)濾設備、干熱消毒柜、電爐等。 滅菌鍋的選擇應根據不同的要求選擇不同型號的滅菌鍋。一般實(shí)驗室可選用小型的醫用手提式高壓滅菌鍋,較大的實(shí)驗室可選用立式自動(dòng)控制壓力和溫度的滅菌鍋。生產(chǎn)性的實(shí)驗室可選用大型的臥式滅菌鍋。 
    如果沒(méi)有條件的話(huà),可以將上述工作間合并成一個(gè)準備間,要求是設備的安裝和排列要合理、房間要寬敞、明亮、透風(fēng),地面要便于清潔、防滑。
 1.4無(wú)菌操作室
      無(wú)菌操作室主要用于實(shí)驗材料的接種操作,所以又叫接種室。通常由里外兩間組成,外間是緩沖間,用于準備工作,還有防止污染的作用。緩沖間的門(mén)應該與接種室的門(mén)錯開(kāi),兩個(gè)門(mén)也不要同時(shí)開(kāi)啟,以保證無(wú)菌室不因開(kāi)門(mén)和人的進(jìn)出帶進(jìn)雜菌。
    緩沖間內應該設有水槽、實(shí)驗臺、鞋帽架、和柜子、紫外燈。無(wú)菌操作室的內壁應當用塑鋼板或瓷磚裝修,工作人員進(jìn)入操作間前要穿上消過(guò)毒的工作服和拖鞋。 室內應配有超凈工作臺,紫外燈、解剖鏡、各種接種器械等。
   1.5培養室
      為了控制培養室的溫度和光照時(shí)間及其強度,培養室的房間不要窗戶(hù),但應當留一個(gè)通氣窗,并安上排氣扇。室內溫度由空調控制,光照由日光燈控制。天花板和內墻***好用塑料鋼板裝修,地面用水磨石或瓷磚鋪設,一般要分兩間,一為光照培養室,一為暗培養室。培養室外應有一預備間或走廊。 
培養室應配有培養架、轉床、搖床、光照培養箱、生化培養箱、自動(dòng)控時(shí)器等。日光燈一般用40W,固定在培養架的側面或擱板的下面,每層有兩支日光燈,距離在20cm,光照強度為2000-3000lx。 2.輔助實(shí)驗室  2.1鑒定室       
細胞學(xué)鑒定室  其功能是對培養材料進(jìn)行細胞學(xué)鑒定和研究。要求清潔、明亮、干燥,使各種光學(xué)儀器不受潮濕和灰塵污染。應配置各種顯微鏡、照相系統等。    生化分析室在以培養細胞產(chǎn)物為主要目的的實(shí)驗室中,應建立相應的分析化驗實(shí)驗室,以便于對培養物的有效成分隨時(shí)進(jìn)行取樣檢查。 離心機、酶聯(lián)免疫檢測儀、天平、PCR儀等。 2.2、溫 室 用于試管苗的鍛煉和移植,為試管苗提供滿(mǎn)足生長(cháng)的適宜環(huán)境條件。 常用設備有:溫室 、彌霧裝置、蔭棚、移栽床、缽、盆、基質(zhì)等. 

細胞培育室走廊

                               普通細胞培養室內走廊

細胞培育室工作區
                                           普通細胞培養室一角
萬(wàn)級層流細胞培育室
                                         萬(wàn)級層流細胞培養室
 
 2.動(dòng)物細胞培養實(shí)驗室設置
無(wú)菌條件:凈化工作室,風(fēng)淋室,傳遞窗,高效過(guò)濾器,潔凈層流罩,生物安全柜,超凈工作臺,紫外燈,電熱干燥箱,濾器,高壓滅菌器,抗生素。 
細胞生長(cháng)條件:純水蒸餾器,純水儀,培養板,培養瓶, CO2培養箱,培養基,血清 細胞檢測條件:倒置顯微鏡,酶標儀 ,微孔板震蕩器,高速離心機,移液器 。
細胞保存條件:液氮罐 實(shí)驗室  準備間  緩沖間  培養室  。
實(shí)驗室的要求
①和緩沖間相連,緩沖間內備消毒服裝和鞋,口罩等,入內換上 
②設置1—2臺超凈工作臺 
③室內空氣不流通,有適當的光線(xiàn),清潔,干燥
 ④側部可設傳遞窗,用于物品傳遞 
⑤照明用熒光燈為好,消毒用紫外線(xiàn)燈 
⑥在室內工作時(shí),動(dòng)作應輕微
 
準備間內設備
①大、小水槽②消毒設備③消毒后的物品和器械保藏柜④烘箱
⑤蒸餾器(包括雙蒸,三重蒸餾水)⑥玻璃器皿,培養液等⑦電爐等 
注意: 
①配制溶液要用新鮮的純水,配制過(guò)程避免交叉感染
 ②設備排列緊湊 
③指定一處可暫放不污及有毒物質(zhì) 準備間設備
CO2培養箱:37度+/-0.5度;能調節溫度和CO2濃度
 消毒器:高壓鍋,蒸汽滅菌鍋,干燥消毒箱 
冰箱:4度或-20度家用冰箱,保存一般制劑;-70度保存蛋白制劑 
水質(zhì)純化裝置:凈化水質(zhì)用于清洗或配制培養液 
另外:顯微鏡,離心機,酸度計,天平,液氮罐、真空泵等。
 
案例一
名稱(chēng):某生物學(xué)研究所植物細胞實(shí)驗室
實(shí)驗室面積:500m2的實(shí)驗場(chǎng)地,
擁有1個(gè)層流的細胞操作間、2個(gè)普通培養操作間、1個(gè)無(wú)菌室、及配套實(shí)驗室和洗滌消毒室、緩沖房。
  植物細胞實(shí)驗室平面設計圖
案例二:
以下為某干細胞治療中心萬(wàn)級潔凈實(shí)驗室建設方案
一、施工原則
1、)統一施工驗收要求,做到保證工程質(zhì)量、節約能源、保護環(huán)境、安全操作。
2、)萬(wàn)級潔凈室施工前必須按照設計圖紙施工,并且制定詳盡的施工方案和程序
3、)施工所用的所有材料、設備必須符合設計規定并有質(zhì)量鑒定文件。
 
二、實(shí)驗室設計依據
 
1、《實(shí)驗室生物安全通用要求》GB-19489-2004
2、《生物安全實(shí)驗室建筑技術(shù)規范》GB50346-2004
3、《潔凈廠(chǎng)房設計規范》(GB50073-2001)
4、《潔凈室施工及驗收規范》(JGJ71-90)
5、《通風(fēng)與空調工程施工及驗收規范》(GB50243-2000)
6、《采暖與空調調節設計規范》(GBJ114-88)
7、《建筑設計防火規范》(GBJ 16-87)
8、《低壓配電裝置及線(xiàn)路設計規范》(GBJ54-83)
三、萬(wàn)級干細胞實(shí)驗室凈化通風(fēng)系統
萬(wàn)級無(wú)菌實(shí)驗室利用送、回風(fēng)量維持房間壓差;送風(fēng)經(jīng)初、中、高效過(guò)濾后送入室內。(回風(fēng)比例為80%,新風(fēng)比例為20%)
3.3干細胞實(shí)驗室結構
從保溫角度考慮實(shí)驗室的圍護及吊頂結構采用厚度為50mm的凈化實(shí)驗室專(zhuān)用聚苯乙烯夾心復合彩鋼板(優(yōu)點(diǎn):機械強度高,隔熱、隔音、防潮性能好、平整光滑、耐腐蝕、易清潔、安裝方便)。頂棚及板壁的墻角處和墻與地面、墻與吊頂采用圓弧陰陽(yáng)過(guò)渡并封閉。所有配套鋁合金型材均采用優(yōu)質(zhì)電泳型材,以防止實(shí)驗室以后消毒時(shí)導致鋁材氧化。
3.2萬(wàn)級干細胞實(shí)驗室凈化通風(fēng)系統
萬(wàn)級無(wú)菌實(shí)驗室利用送、回風(fēng)量維持房間壓差;送風(fēng)經(jīng)初、中、高效過(guò)濾后送入室內。(回風(fēng)比例為80%,新風(fēng)比例為20%)
3.3干細胞實(shí)驗室結構
從保溫角度考慮實(shí)驗室的圍護及吊頂結構采用厚度為50mm的凈化實(shí)驗室專(zhuān)用聚苯乙烯夾心復合彩鋼板(優(yōu)點(diǎn):機械強度高,隔熱、隔音、防潮性能好、平整光滑、耐腐蝕、易清潔、安裝方便)。頂棚及板壁的墻角處和墻與地面、墻與吊頂采用圓弧陰陽(yáng)過(guò)渡并封閉。所有配套鋁合金型材均采用優(yōu)質(zhì)電泳型材,以防止實(shí)驗室以后消毒時(shí)導致鋁材氧化。
3.4干細胞實(shí)驗室照明燈具
實(shí)驗室照明均采用專(zhuān)用潔凈室照明燈具(不銹鋼斜邊型吸頂式帶罩密封燈具)。特點(diǎn):鏡面全內膽,照明度強,不銹鋼邊框年久不腐蝕,外形美觀(guān),密封好、抗干擾、不積塵、易清潔。
3.5干細胞實(shí)驗室消毒
    實(shí)驗室消毒采用紫外線(xiàn)燈照射消毒
3.6干細胞實(shí)驗室氣流組織方式
從節能角度考慮實(shí)驗室系統設計為新風(fēng)+回風(fēng)混合系統,采用頂送側下回的氣流組織方式。
3.7干細胞實(shí)驗室空調系統工程
萬(wàn)級無(wú)菌實(shí)驗室采用風(fēng)冷直接膨脹式凈化專(zhuān)用風(fēng)管型空調機組,滿(mǎn)足實(shí)驗室夏季、冬季冷熱負荷,保持實(shí)驗室恒溫恒濕。
3.8干細胞實(shí)驗室防氣流倒灌系統
實(shí)驗室新風(fēng)管上均安裝電動(dòng)密閉閥以防止關(guān)機時(shí)空氣回流。并能封閉消毒。
 
干細胞實(shí)驗室平面圖
    以8m*13m的大小面積為例,建立的干細胞實(shí)驗室平面圖。
 
干細胞培育室平面布局 圖
 
科瓦特細胞培養室建設方案
   科瓦特提供實(shí)驗室整體建筑布局和裝修、空氣調節、給排水、氣體供應、電氣設計、集中控制、安防、施工工藝、檢測、培訓等多方面內容。科瓦特實(shí)驗室可根據客戶(hù)要求設計、施工,提供一站式實(shí)驗室整體供應服務(wù)!


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動(dòng)物細胞實(shí)驗室設計               植物細胞實(shí)驗室設計方案

              動(dòng)物細胞實(shí)驗室設計                                                          植物細胞實(shí)驗室設計

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此文關(guān)鍵字:細胞培育室,細胞實(shí)驗室,

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